Диагностика сифилиса микробиология

Лабораторная диагностика сифилиса

Диагностика сифилиса микробиология
сифилис характеризуется богатой палитрой манифестных и латентных форм, распознавание которых основывается на комплексном клинико-лабораторном обследовании больного. Материалом для исследования от больных сифилисом служит кровь, отделяемое твердого шанкра, пунктат регионарных лимфатических узлов, ликвор.

Выбор материала для исследования и метода микробиологической диагностики определяется стадией патогенеза болезни. Лабораторная диагностика включает бактериоскопический (в начальной стадии) и серологический методы.

Бактериологическое исследование обычно не проводят, так как доступные методы выделения чистой культуры возбудителя не разработаны.

В связи с тем, что возбудитель сифилиса (Treponema pallidum) в отличие от других микроорганизмов плохо культивируется на питательных средах in vitro, а также слабо воспринимает анилиновые красители, все существующие методы ее детекции можно подразделить на прямые и непрямые:

• прямые тесты основаны на непосредственном выявлении возбудителей в очагах поражения; ним относятся: (1) темнопольная микроскопия (в том числе прямой тест на Т. pallidum с флюоресцентными антителами – DFA-TP), (2) RIT (rabbit infektivity test) – заражение материалом от больных кроликов, и (3) ПЦР (пролимеразная цепная реакция – метод, базирующиеся на амплификации нуклеиновых кислот).

• непрямые тесты основаны на выявлении АТ к возбудителю сифилиса в сыворотке крови – серологическая диагностика (лабораторный анализ плазмы каппилярной или венозной крови основанный на иммунологической реакции антиген-антитело (АГ-АТ)), а также редко используемые гистологические исследования. В свою очередь, все существующие в настоящее время серологические тесты на сифилис подразделяются на две основные группы:

• нетрепонемные: реакция связывания комплемента с кардиолипиновым АГ (РСКк), реакция микропреципитации (РМП), тест быстрых плазменных реагинов – Rapid Plasma Reagins (RPR), Veneral Disease Research Laboratory (VDRL), тест с толуидиновым красным – Toluidin Red Unheated Serum Test (TRUST);

• трепонемные – ракция связывания комплемента с трепонемным АГ (РСКт), реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ или РИТ), реакция иммунофлюоресценции (РИФ) (за рубежом – FTA – Fluorescent Treponemal anibody) с вариантами: РИФ-200 (FTA-200), РИФ-абс (FTA-abs), реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) – за рубежом – Treponema pafluidum haemagglutination assay (TPHA), иммуноферментный анализ (ИФА) – за рубежом – Enzymelynked immunosorbent asay (ELISA), иммуноблоттинг (Western Blot).

ПРЯМЫЕ ТЕСТЫ

Темнопольная микроскопия. Прямая визуализация трепонем методом темнопольной микроскопии является убедительным доказательством трепонемной природы заболевания. Наиболее эффективен этот метод при первичном и вторичном сифилисе, наличии поражения кожи и слизистых оболочек.

При микроскопии следует дифференцировать Т. pallidum, подвид pallidum, с нитями фибрина, а также с трепонемами нормальной микрофлоры организма человека – Т. refringens и Т. denticola. Т.

refringens колонизирует слизистые оболочки наружных половых органов и отличается выраженной подвижностью и отсутствием сгибательных движений. Т. denticola колонизирует слизистую оболочку ротовой полости, ее завитки короче и направлены под более острым углом.

Темнопольная микроскопия обладает чувствительностью 74–86% и специфичностью до 97% в зависимости от квалификации исследователя. Чувствительность может снижаться, если повреждение было протерто антисептиком.

Вместе с тем отрицательный результат, обусловленный различными факторами, не является основанием для исключения диагноза сифилиса и требует дальнейшего подтверждения методами серологической диагностики. Кроме того, с помощью этого метода невозможно наблюдать за динамикой инфекционного процесса и оценивать эффективность терапии.

Прямой тест на Т. pallidum с флюоресцентными антителами (DFA-TP) использует флюоресцеинконъюгированные АТ для окраски организма в мазках и срезах тканей. DFA-TP не требует подвижных организмов, является более чувствительным и специфичным, но более дорогим и технически сложным, чем темнопольная микроскопия.

На чувствительность обоих микроскопических методов может отрицательно повлиять давность возникновения или состояние повреждения, а также то, получал ли пациент лечение.

Биологический метод диагностики (RIT – заражение материалом от больных кроликов), несмотря на его высокую чувствительность, применяется весьма ограничено из-за таких факторов, как длительность получения результатов и высокая стоимость. Он практически не используется в настоящее время.

К прямым методам определения Т. pallidum по данным ряда зарубежных авторов относятся методы, базирующиеся на амплификации нуклеиновых кислот, такие как ПЦР, которые могут определять наличие всего 10 трепонем в повреждениях, тканях плаценты и других тканях организма. Они существенно улучшили чувствительность и специфичность прямых методов детекции. Множественный ПЦР с одновременным определением Т. pallidum, вируса герпеса типа 2 и Haemophilis ducreyi используется для постановки этиологического диагноза у пациентов с GUD (genital ulcer disease), а также для обоснования алгоритмов синдромного лечения. Поскольку ПЦР-методики для сифилиса коммерчески недоступны, они остаются инструментом исследователей.

(!) Ведущая роль в лабораторной диагностике сифилиса принадлежит серологическим методам исследования, так как Т. pallidum порождает иммунные ответы различного характера. Рассмотрим существующие в настоящее время серологические тесты на сифилис (непрямые тесты).

НЕПРЯМЫЕ ТЕСТЫ

Нетрепонемные тесты. В нетрепонемных тестах применяется АГ нетрепонемного происхождения (как правило, кардиолипин-лецитин-холестериновый АГ). АТ к фосфолипидным АГ на поверхности трепонем дают перекрестную реакцию с кардиолипиновыми АГ млекопитающих. Флоккуляционные (хлопьеобразующие) методики для обнаружения этих АТ к фосфолипидам были разработаны как неспецифичные скрининговые тесты.

К ним относятся РМП и ее модификации: RPR-, VDRL-, TRUST-тест. В данных тестах обнаруживаются IgG- и IgM-АТ к липидам клеточной стенки Т. pallidum, которые появляются в крови примерно через 1 нед. после формирования твердого шанкра. Эти тесты просты, быстры, недороги и обладают превосходной чувствительностью, особенно в ранний период инфекции.

Главные недостатки – невозможность использования цельной крови, необходимость ротатора или микроскопа, возможность ложноположительных результатов. У беременных женщин до 28% положительных результатов RPR могут быть биологически ложноположительными. Ложнонегативные результаты могут быть при избытке АТ, что известно как феномен prozone.

Перекрестная реактивность может иметь с другими трепонемными инфекциями, включая фрамбезию и пинту.

Нетрепонемные тесты могут быть качественными или полуколичественным. RPR- и VDRL-титры возрастают у пациентов с острой инфекцией, реинфекцией или реактивацией давней инфекции, которая не былa удовлетворительно вылечена. Около 72–84% пациентов с первичным или вторичным сифилисом демонстрируют 4-кратное снижение RPR- и VDRL-титров через 6 мес. после завершения правильного лечения. Скорость серореверсии зависит от титра до лечения и стадии заболевания. Индивиды с первым эпизодом инфекции более склонны к серореверсии, чем индивиды с повторной инфекцией. Поэтому нетрепонемные тесты используются не только для определения активной инфекции, но и для наблюдения за эффективностью лечения.

Трепонемные тесты, такие как РСКт, РИБТ или РИТ, РИФ (за рубежом – FTA и FTA-ABS), РПГА (TPHA или ТРРА), используются для подтверждения позитивных скрининговых тестов, распознавания ложноположительных результатов нетрепонемных тестов, при клиническом, эпидемиологическом и анамнестическом подозрении на сифилис, для диагностики скрытых форм заболевания, установления ретроспективного диагноза пациента. В трепонемных тестах применяются АГ трепонемного происхождения.

РИТ и РИФ обладают более высокой чувствительность (74–94 и 84–99%) и специфичностью (99 и 97% соответственно) и применяются для подтверждения результатов отборочных реакций, распознавания ложноположительных результатов РМП и РСК, а также установления ретроспективного диагноза сифилиса. Недостатками этих методов является техническая сложность, длительность постановки, субъективизм в оценке результатов, высокая стоимость исследования, необходимость высококвалифицированных сотрудников. Следует учитывать также, что, по данным ряда авторов, примерно у 85% адекватно пролеченных больных трепонемные тесты остаются положительными в течение нескольких лет и даже в течение всей жизни, поэтому не могут быть использованы в качестве контроля излеченности. Трепонемные тесты дороги, требуют оборудования и технической подготовки, доступны только в центральных лабораториях. Иммуноблоттинг предполагался как альтернатива РИФ-абс (FTA-ABS) в качестве подтверждающего теста. Он более чувствителен, чем РИФ-абс (FTA-ABS), но менее чувствителен, чем РПГА (ТРРА). Частота ложноположительных результатов немного меньше в трепонемных тестах, чем в нетрепонемных. Трепонемные тесты обычно не используются для скрининга, поскольку они не так чувствительны, как нетрепонемные, в первые 2–3 нед. первичной стадии сифилиса. Трепонемные АТ часто персистируют в течение жизни, делая эти тесты менее применимыми в качестве подтверждающих в областях с высокой распространенностью заболевания; они также неприменимы для наблюдения за эффективностью лечения. В последние годы в отечественную практику лабораторной диагностики сифилиса внедряются стандартизированные высокоинформативные методы серодиагностики – ИФА и РПГА. Принцип ИФА заключается в соединении комплекса АГ-АТ с конъюгатом, содержащим ферментную метку, выявляемую с субстратной смеси. РПГА применяется для выявления специфических АТ к T. pallidum в сыворотке крови: при соединении АГ T. pallidum со специфическими АТ в реакции на микропланшете наблюдается феномен агглютинации эритроцитов. Плюсами данных методов является то, что тест-системы для ИФА и РПГА сертифицированы и регулярно контролируются соответствующими организациями. Из-за простоты постановки, возможности автоматического учета и быстроты получения результатов при исследовании огромного количества проб ИФА и РПГА могут использоваться как в качестве отборочных, так и подтверждающих реакций, поскольку превосходят по чувствительности, специфичности, воспроизводимости КСР и не уступают РИТ и РИФ. Но, следует отметить, что ИФА, как и другие реакции на сифилис, могут давать как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Первые могут возникнуть за счет ревматоидного фактора (представляющего собой IgG человека) перекрестно реагирующего с трепонемными АГ; за счет АТ, образующихся при различных системных заболеваниях или индуцированных лекарственными препаратами, наркотиками, нарушениями обмена; у новорожденных – путем образования в организме плода или ребенка IgМ-АТ к IgG матери, что значительно осложняет интерпретацию результатов и установление диагноза врожденного сифилиса. Ложноотрицательные результаты реакции обусловлены наряду с техническими ошибками конкуренцией между IgМ и IgG, поскольку последний обладает большим аффинитетом. Отрицательной стороной РПГА служит то, что данный тест не может быть использован в качестве критерия излеченности заболевания, так как негативация таких реакций, как правило, затруднена, более того, они могут оставаться положительными в течение всей жизни.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ

Недостатки серодиагностики сифилиса послужили толчком к разработке молекулярно-генетических методов диагностики сифилиса, получивших широкое распространение в последние годы. Запатентованы способы ПЦР-диагностики сифилиса (метод определения специфицеских последовательностей ДНК T. pallidum, заключающийся в амплификации ДНК). Однако несмотря на целый ряд преимуществ ПЦР-диагностики, эти методы обладают и существенными недостатками, среди которых необходимо отметить их высокую стоимость, обусловленную дороговизной праймеров для ПЦР-диагностики и высокой стоимостью лабораторного оборудования, что ограничивает применение этих методов в лабораторной практике. В настоящее время разрабатываются новые диагностические методы, основанные на выявлении молекулярных маркеров органных поражений при сифилисе методом газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ-МС).

Привлечение в арсенал методов лабораторной диагностики сифилиса ГХ-МС позволяет с высокой степенью достоверности определить наличие T. pallidum в организме по наличию специфического молекулярного маркера.

В соответствии с данными исследованиями было показано, что биохимический состав сыворотки крови больных сифилисом отличается от сыворотки здоровых доноров. В сыворотке крови больных сифилисом присутствуют липидные, углеводные и аминокислотные компоненты, которые могут служить молекулярными маркерами присутствия T.

pallidum в организме (К.А.Осман, 2004). Также методом ГХ-МС были установлены химические соединения, являющиеся молекулярными маркерами органных поражений на ранних стадиях заболевания. По данным исследования К.А. Осман (2004 г.

), такими соединениями при поражении ЦНС являются D-галактоза, D-трентол, глюкоза и ее циклический изомер – инозитол, при поражении печени – ароматические производные жирных кислот (фенилпропионовая и фенилуксусная кислота), аминокислотные фрагменты, липидно-белковый комплекс, при поражении костей – летучие жирные кислоты, липополисахариды и их субъединицы (С18-С20). Таким образом, привлечение в диагностический арсенал методов газовой хроматографии и масс-спектрометрии позволяет с высокой степенью достоверности определить наличие поражения органов и систем при отсутствии положительных серологических реакций и выраженных клинических проявлений болезни.

Источник: https://doctorspb.ru/articles.php?article_id=1686

91 – микробиология экзамен

Диагностика сифилиса микробиология

91.   Патогенные спирохеты(возбудители сифилиса, возвратного тифа, клещевого боррелиоза): морфология,культуральные и тинкториальные свойства, биохимические особенности, антигеннаяструктура и токсинообразование, эпидемиология, патогенез и клиника.Микробиологическая диагностика. Профилактика и лечение.

  Спирохеты -тонкие, спирально завитые бактерии длиной от нескольких до нескольких сотенмикрометров, подвижные, грамотрицательные, хемоорганотрофы. Выделяют триосновных типа движений – быстрое вращение вокруг продольной оси, сгибательные,штопорообразные (винтообразные). Медицинское значение имеют представители родовTreponema, Borrelia, Leptospira и Spirillum.

Род Treponema.

Род представлен туго закрученными спиралевиднымибактериями длиной 5 – 20 мкм. Наиболее известный патогенный для человека вид -T. pallidum (бледная трепонема), подвид T. pallidum pallidum – возбудительсифилиса.

Патогенные трепонемы дифференцируют по патогенностидля различных видов лабораторных животных, способности ферментировать маннит,утилизовать лактат и образовывать специфические метаболиты.

“Lues Venerae” – “любовная чума” – одно из названийсифилиса (люес).

Морфология.

Возбудитель сифилиса имеет спиралевидную форму содинаковыми по высоте завитками (более 10). Характер подвижности – плавныевинтообразные и сгибательные движения (Treponema -с лат. – сгибающаяся нить).По Романовскому – Гимзе окрашиваются в бледно – розовый цвет (pallidum – слат.- бледная). Легко выявить при помощи темнопольной микроскопии и послеинпрегнации серебром.

Культуральные и биохимические свойства.

Бледная трепонема чрезвычайно прихотлива к условиямкультивирования и не способна длительно расти на питательных средах. Отличаетсяочень медленным темпом размножения.

В лабораторных условиях можно культивироватьна кроликах, заражая их интратестикулярно (орхит с накоплением трепонем).

Биохимические свойства изучены слабо в связи с проблемами культивирования и дляхарактеристики T.pallidum практически не используются.

Антигенные характеристики.

Трепонемы имеют перекрестно – реагирующие антигены сдругими спирохетами (боррелиями, лептоспирами). В связи с наличием в составеклеточных стенок бледных трепонем фосфолипидов (кардиолипин и др.

), аналогичныхклеткам млекопитающих, в ответ на эти антигены в организме вырабатываютсяспецифичные не только для возбудителя сифилиса, но и перекрестно- реагирующиена кардиолипин и другие фосфолипиды тканей человека и животных так называемыевассермановские антитела.

Они выявляются в РСК с кардиолипиновым антигеном (изсердец животных). Специфические антитела к возбудителю сифилиса выявляют в РНИФи иммуноблоте.

Антиген Вассермана – фосфолипид, входящий в составмитохондриальных мембран (кардиолипин). Его получают из бычьего миокарда -ткани, богатой митохондриями. Благодаря антигенной общности с тканевымифосфолипидами, антитела к кардиолипину трепонем реагируют с тканевым(митохондриальным) кардиолипином.

Истинные аутоантитела против тканевогокардиолипина образуются при “антимитохондриальном (антифосфолипидном)синдроме”, обусловливая положительные реакции Вассермана (ложноположительные -применительно к возбудителю сифилиса) при коллагенозах (системная краснаяволчанка, ревматоидный артрит), проказе и других тяжелых инфекциях, связанных сповреждением тканей, при гемолитической анемии, при наркоманиях.

Патогенетические особенности.

Развитие сифилиса определяется двумя основнымимеханизмами – склонностью к генерализации (высокая инвазивность) ипериодической активизацией длительно персистирующего в организме возбудителя(“выход из засады”).

Из-за неустойчивости возбудителя во внешней средезаражение происходит при прямых контактах ( в подавляющем большинстве случаевполовым путем). Проникая через слизистые оболочки и незначительные повреждениякожи, возбудитель быстро проникает в ткани, распространяется лимфогенно и далее- гематогенно (генерализация).

Первые признаки болезни (первичный сифилис) возникаетпосле инкубационного периода (в среднем 3 – 4 недели).

В месте внедрения(первичной инвазии) происходит размножение возбудителя и возникает твердыйшанкр – плотный безболезненный красноватый узелок, превращающияся в язву.

Одновременно в результате проникновения трепонем в лимфатические узлыразвивается регионарный лимфаденит и в дальнейшем – полиаденит. Генерализацияинфекции происходит еще до появления шанкра и лимфаденита, т.е. сифилис ссамого начала – системное заболевание.

После затихания клиники первичного сифилиса черезнекоторое время ( от нескольких недель до нескольких месяцев) происходитрецидив инфекции, связанный с полиорганной репликацией трепонем (вторичныйсифилис).

Наблюдаются поражения кожи и слизистых (вторичные сифилиды, в которыхнаходится большое количество трепонем), поражения внутренних органов,лимфоузлов, костей, суставов и мн.др.

С учетом многообразия поражений вторичныйсифилис называют “великим мистификатором”.

После вторичного сифилиса у части больных вновьформируется латентный сифилис (возбудитель уходит в подполье на годы), которыйу половины носителей может переходить в третичный сифилис.

Он характеризуетсяформированием очагов гранулематозного воспаления – гумм, содержащих малотрепонем (практически не заразных). Распад гумм приводит к разрушению костных имягких тканей и поражению жизненно важных органов.

В отличие от первичного ивторичного сифилиса, третичный сифилис – хронический процесс, который никогдане завершается самоизлечением.

Мало известно о факторах патогенности T.pallidum имеханизмах, позволяющих ему длительно ускользать от иммунологического надзора.Обнадеживает,что этот возбудитель сохраняет высокую чувствительность кантибиотикам. Современный сифилис по- прежнему хорошо поддается лечению, еслипроцесс не достигает необратимых органических поражений.

Лабораторная диагностика.

При первичном и вторичном сифилисе возбудитель можнообнаружить в очагах поражений микроскопией. Более оптимальны для выявлениябледных трепонем темнопольная и иммунолюминесцентная микроскопия. При первомметоде необходимо исключить возможные артефакты (нити фибрина, например),наличие сапрофитических трепонем. T.

refringens колонизирует наружные половыеорганы, отличается высокой подвижностью и отсутствием сгибательных движений.T.denticola колонизирует ротовую полость, ее завитки короче и направлены подболее острым углом. В ротовой полости человека встречается также T.

vincentii,которая в ассоциации с другими микроорганизмами может вызывать язвенно -некротическую ангину.

Кроме возбудителя сифилиса имеются очень близкие вгенетическом и антигенном отношении трепонемы других подвидов T.pallidum,вызывающие поражения человека в странах с жарким климатом (фрамбезию, бержель,пинту).

При окраске по Романовскому – Гимзе T.pallidumокрашивается в розовй цвет, непатогенные трепонемы – в синий или фиолетовый,T.refringens прокрашивается фуксином в красный цвет. Люминесцентная диагностикашироко применяется для выявления трепонем в различных клинических материалах.Среди методов выявления возбудителя наибольшей чувствительностью и достаточнойспецифичностью обладает ПЦР.

Основные методы диагностики – серологические, т.е.выявление сывороточных антител.

Применяют РСК с кардиолипиновым и трепонемнымантигеном, флоккуляционные пробы (микроагглютинационный тест на кардиолипиновыеантитела), РНГА.

Более специфичными и чувствительными тестами являются тесты,основанные на непрямой иммунофлюоресценции (РИФ), реакция иммобилизации бледнойтрепонемы, ИФА на основе рекомбинантных белков трепонем.

В серодигностике сифилиса необходимо учитыватьсеронегативность первичного сифилиса в первые недели заболевания. Необходимосочетание методов , основанных на выявлении антител как против кардиолипиновых,так и трепонемных антигенов.

Кардиолипиновые тесты быстро становятсясеронегативными после элиминации возбудителя (спустя несколько месяцев),антитрепонемные антитела сохраняются намного дольше.

Существенное значение дляопределения активности процесса имеет определение антитрепонемных IgM – антител(при выявлении врожденного сифилиса -особо, поскольку IgM – антитела непереходят через плаценту от матери к плоду; при исследовании спинномозговой жидкости- для диагностики нейросифилиса и др.).

Лечение.

Чаще применяют депонированные пенициллины спролонгированным действием, при непереносимости – макролиды, тетрациклины,цефалоспорины.

Специфической профилактики не существует.

Род Borrelia

Морфология и классификация.

Спиральные, имеющие до 10 неправильной формы крупныхзавитков, грамотрицательные бактерии с вращательно- поступательным характеромдвижений. Анаэробы, часто требующие сложных сред для культивирования.

Патогенные для человека боррелии являютсявозбудителями возвратных тифов (рекуррентных лихорадок) или боррелиозов.B.recurrens передается человеку вшами, вызывает эпидемический или вшивыйвозвратный тиф.

Остальные боррелиозы человека делят на две самостоятельныегруппы – аргасовые клещевые боррелиозы (АКБ), вызываемые более 12 видамиборрелий, и иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ), вызываемые B.burgdorferi sensustricto, B.garinii, B.

afzelii и некоторыми другими.

АКБ связаны с аргасовыми клещами рода Ornithodorus,обитающими в тропических и субтропических регионах Африки, Азии, Америки, ихарактеризуются повторяющимися приступами лихорадки (как при малярии). ИКБвызывают клещи рода Ixodes (группа I.ricinus / I.persulcatus), распространеныпреимущественно в лесной зоне в Евразии и Америке.

Культуральные свойства.

Представители этого рода взыскательны к условиямкультивирования, особенно боррелии группы ИКБ. Для них необходимы факультативно- анаэробные условия, температура плюс 33 градуса Цельсия, специальные среды(BSK-2), содержащие среду 199, глюкозу, альбумин, цистеин, кроличью сыворотку,желатин и другие компоненты.

Антигенные свойства.

Имеют перекрестно- реагирующие антигены с другимиспирохетами, родо – и видоспецифические антигены. Выделяют H- (жгутиковые)флагеллиновые антигены (обладают слабой специфичностью) и поверностные белковыеантигены (OspA, OspC, более специфичны, используют для межвидовой ивнутривидовой идентификации).

Патогенез поражений.

После присасывания клеща боррелии со слюной попадают вмакроорганизм, размножаются во входных воротах инфекции, поражая кожу (эритема)и ближайшие лимфоузлы (фаза первичной адаптации).

Преодолев кожный илимфатический барьеры, боррелии попадают в кровь, вызывают спирохетемию,проявляющуюся общетоксическим синдромом (стадия первичной диссеминации). Помере прогрессирования процесса боррелии проникают через гематотканевые барьеры(в т.ч.

– через гематоэнцефалитический барьер) и вызывают поражение различныхорганов и систем. В ряде случаев инфекция приобретает хронический характер,вызывая поражения нервной и сердечно – сосудистой систем, опорно -двигательного аппарата, вторичные поражения кожи и др.

Существует недостаточнообоснованное на современном этапе мнение о связи преимущественных клиническихпроявлений с геновидовой принадлежностью боррелий ( B.garinii – преимущественноневрологические проявления, например).

Эпидемиология.

ИКБ – облигатно- трансмиссивные природноочаговыеинфекции, распространенные преимущественно в умеренном климатическом поясесеверного полушария, лесной ландшафтной зоне и связанные с присасыванием клещейрода Ixodes. Очаги ИКБ часто сопряжены с очагами клещевого энцефалита,поскольку имеют одних и тех же переносчиков в Евразии – клещей I.reticulatus(таежный клещ) и  I.ricinus (европейскийлесной клещ).

Лабораторная диагностика.

Боррелии можно выделить с использованием среды BSK2 убольных из очагов кожных поражений, из крови и спинномозговой  жидкости (при менингиальных формах), приисследовании переносчиков (в т.ч. снятых с людей) и теплокровных хозяев(наибольшая высеваемость – из мочевого пузыря) в природных очагах.

Боррелии можно выявить в иксодовых клещах с помощьюсветовой микроскопии (окраска по Романовскому – Гимзе), темнопольной илюминесцентной микроскопии, ПЦР.

Основной метод серологической диагностики – реакциянепрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) с корпускулярным антигеном B.afzelii,позволяющим выявлять антитела к боррелиям группы ИКБ.

Лечение.

Применяют предупредительную терапию (при положительныхрезультатах исследования присосавшегося клеща) и лечение больных ИКБтетрациклинами, пенициллинами и цефалоспоринами. Мер специфической профилактикине разработано.

Источник: https://www.sites.google.com/site/mikrobiologiaekzamen/91

iHerb

Диагностика сифилиса микробиология

Бледная трепонема – возбудитель сифилиса

Сифилис – циклически протекающее венерическое заболевание человека, вызываемое бледной спирохетой; I стадия проявляется твердым шанкром (фр. chancre – язва), II стадия – поражением стенки сосудов и различными сыпями, III – гуммами в различных органах с поражением нервной системы. Гумма (лат.

gummi – камедь) – хронический инфильтрат в виде узла, склонный к распаду и изъязвлению. Сифилитическая гумма (син.: сифилитическая гранулема, сифилид гуммозный, сифилома третичная) – безболезненная полушаровидная гумма, являющаяся проявлением третичного активного сифилиса.

Возбудитель – Treponema pallidum – был открыт в 1905 г. Ф. Шаудином и Э. Гофманом.

T. pallidum – микроорганизм спиралевидной формы, размерами 0,09 – 0,18 ? 6 – 20 мкм. Число завитков спирали от 8 до 12, завитки равномерны, расположены друг от друга на одинаковом расстоянии около 1 мкм, высота по направлению к концам уменьшается. В электронном микроскопе имеет вид змеи или дождевого червя.

На обоих концах трепонемы расположены блефаропласты с прикрепленными к ним жгутиками, число которых варьирует от двух до нескольких, они образуют осевую нить, закрученную вокруг протоплазматического цилиндра спирохеты. При неблагоприятных условиях может образовывать цисты.

В организме животных может возникать мукополисахаридной природы капсулоподобный чехол.

Трепонема плохо окрашивается анилиновыми красителями, в связи с чем возбудитель сифилиса и получил название бледной спирохеты.

Восстанавливает нитрат серебра в металлическое серебро, которое откладывается на поверхности микроба и делает его видимым в тканях: при окраске по Морозову трепонемы выглядят коричневыми или почти черными. При окраске по Романовскому – Гимзе приобретают бледно-розовый цвет.

Трепонемы обычно размножаются поперечным делением, при этом разделившиеся клетки могут в течение некоторого времени прилегать друг к другу. Время деления – около 30 ч.

Живые трепонемы очень подвижны, совершают движения вокруг собственной продольной оси, а также сгибательное, волнообразное и поступательное движение.

До настоящего времени пока нет такого метода, при котором бы удавалось стабильно получать культуры трепонем. Патогенные для человека бледные трепонемы никогда не удавалось культивировать на искусственных питательных средах, в куриных эмбрионах или культурах клеток.

Те разновидности их штаммов, которые растут в анаэробных условиях, являются, вероятно, сапрофитными спирохетами, близкими к возбудителю сифилиса. Физиология их остается мало изученной. Трепонемы относятся к хемоорганотрофам, не имеют каталазы и оксидазы, могут сбраживать углеводы.

Они растут на очень богатых средах, содержащих до 11 аминокислот, витамины, соли, сывороточный альбумин. Наилучшим способом выращивания патогенных спирохет является заражение кролика в яичко (экспериментальный орхит). Высказано предположение о существовании у T.

pallidum жизненного цикла, включающего, помимо спиралевидной формы, зернистую стадию и стадию кистоподобных сферических тел. Именно зернистые формы этих микроорганизмов способны проходить через бактериальные фильтры.

Антигены трепонем плохо изучены. Установлено, что в составе трепонем имеются белковые, полисахаридные и липидные комплексы.

Антигенный состав культуральных и тканевых трепонем настолько близок, что антигены, приготовленные из культуральных трепонем, можно использовать для РСК при диагностике сифилиса.

В организме человека трепонемы стимулируют выработку антител, которые вызывают иммобилизацию и гибель живых подвижных трепонем, связывают комплемент в присутствии суспензии T. pallidum или родственных спирохет, а также выявляются в непрямой РИФ.

Возбудитель сифилиса не образует экзотоксинов. К внешним воздействиям бледные трепонемы относительно малоустойчивы. Быстро погибают при высушивании и при повышенных температурах (при 55 °C в течение 15 мин).

В 0,3 – 0,5 % растворе HCl моментально утрачивают свою подвижность; так же быстро утрачивают ее и погибают в присутствии препаратов мышьяка, висмута, ртути.

В цельной крови или в сыворотке при 4 °C сохраняют жизнеспособность в течение 24 ч, что следует учитывать при переливании крови.

Эпидемиология. Сифилис – типичное венерическое заболевание. Источник инфекции – больной человек, обычно заразен в течение 3 – 5 лет; больные с поздними формами сифилиса не заразны.

Заражение в подавляющем большинстве случаев происходит при различных видах половых и бытовых контактов, редко трансплацентарным путем от больной матери ребенку (врожденный сифилис) или как профессиональное заражение контактным путем у медицинского персонала.

В естественных условиях сифилисом болеет только человек, в эксперименте возможно заражение обезьян, хомячков и кроликов. У обезьян в месте введения трепонем развивается твердый шанкр, у кроликов и хомячков инфекция протекает бессимптомно.

Патогенез и клиника. Инкубационный период при приобретенном сифилисе варьирует от 2 до 10 нед., обычно 20 – 28 дней. Входными воротами инфекции чаще всего являются слизистые оболочки половых органов, реже – полости рта, а также поврежденная кожа.

В месте внедрения возбудитель размножается, формируется первичная сифилома (твердый шанкр) – эрозия или язва с уплотненным основанием. Далее возбудитель попадает в лимфатическую систему, развивается лимфангоит и регионарный лимфаденит. Это типичная клиника первичного сифилиса, который продолжается 1,5 – 2 мес.

Потом эти признаки исчезают. Вторичный период сифилиса связан с генерализацией процесса, когда увеличиваются многие лимфатические узлы, а на коже и слизистых оболочках появляются высыпания; могут наблюдаться поражения внутренних органов и нервной системы. Различают вторичный свежий и вторичный рецидивирующий сифилис.

При каждом последующем рецидиве интенсивность сыпи становится все менее выраженной, а периоды между рецидивами увеличиваются. В элементах сыпи содержится большое количество живых трепонем, в этот период больной наиболее заразен. Продолжительность вторичного сифилиса – до 4 лет и более.

Далее болезнь вступает в длительный бессимптомный период, по прошествии которого, через несколько лет, развивается третичный сифилис. При этом наблюдаются грубые органические поражения внутренних органов, сердечно-сосудистой системы, ЦНС, костей, формируются гуммы, сопровождающиеся распадом ткани и дегенеративными изменениями.

Характерной клинической особенностью сифилиса является отсутствие каких-либо субъективных жалоб со стороны больного (боль, зуд, жжение и т. д.).

Иммунитет. Против сифилиса ни естественного, ни искусственного иммунитета не возникает; есть только инфекционный иммунитет, и пока он существует, человек практически не восприимчив к новому заражению.

Инфекционный иммунитет развивается через 10 – 11 дней после появления твердого шанкра (шанкерный иммунитет), в этот период повторное заражение или не наблюдается, или новый образовавшийся шанкр протекает абортивно (суперинфекция). В дальнейшем при суперинфицировании характер возникающих поражений соответствует стадии болезни в момент повторного заражения.

Суперинфекция объясняется временным ослаблением или «срывом» инфекционного иммунитета. От суперинфекции необходимо отличать реинфекцию, т. е. новое, повторное заражение человека, ранее болевшего сифилисом (излечившегося) и, следовательно, утратившего инфекционный иммунитет. Описаны случаи даже трехкратного заболевания сифилисом.

Инкубационный период у таких больных короче, чаще развиваются множественные язвенные шанкры с лимфаденитом, серологические реакции становятся положительными раньше. Во вторичном периоде папулы на коже нередко эрозируются.

Это объясняется тем, что при сифилисе развивается реакция гиперчувствительности замедленного типа, после излечения в организме длительно сохраняются сенсибилизированные лимфоциты. Инфекционный иммунитет имеет нестерильный характер и обусловлен гуморальными факторами: в сыворотке больного обнаруживаются иммуноглобулины классов G, A и М.

Лабораторная диагностика. Для диагностики сифилиса оптимален комплексный подход, предполагающий одновременное использование нескольких методов.

Их традиционно подразделяют на прямые, позволяющие доказать наличие возбудителя в исследуемом материале (заражение животных, различные виды микроскопии и молекулярно-генетические методы детекции ДНК T.

pallidum – ПЦР и ДНК-зондирование), и непрямые – серологические тесты для выявления антител. В свою очередь, серологические тесты представлены нетрепонемными и трепонемными.

Исследуемым материалом для обнаружения трепонем в прямых методах является отделяемое твердого шанкра или его пунктат, пунктат лимфатического узла, соскоб из розеолы, ликвор. Лучше всего в нативном материале возбудитель выявляется темнопольной (см. рис. 111.

4) или фазово-контрастной микроскопией, что позволяет наблюдать разные типы движения живого возбудителя. Если уже начато лечение антибиотиками, возбудителя в патологическом материале обнаружить невозможно. При необходимости проводят прямую (или непрямую) РИФ или окрашивают препарат по Романовскому – Гимзе.

Эти методы используют только для ранней диагностики сифилиса.

Серологические тесты можно использовать на различных стадиях заболевания, кроме серонегативного первичного сифилиса. Обычно применяют комплекс серологических реакций.

К нетрепонемным тестам с визуальным определением результатов относятся: реакция связывания комплемента (реакция Вассермана = РСКк = RW) с кардиолипиновым антигеном сердечной мышцы быка (перекрестно реагирующий антиген), реакция микропреципитации (МР, или РМП) – микрореакция с плазмой и инактивированной сывороткой; RPR – тест быстрых плазменных реагинов, и другие реакции. Специалисты считают, что для массового обследования лучше всего применять два теста: RPR и РПГА или ИФА, так как RPR более чувствителен при первичном сифилисе, РПГА – на более поздних стадиях заболевания, а ИФА – на всех стадиях. К нетрепонемным тестам с микроскопическим считыванием результатов относятся VDRL-тест и USR-тест. Нетрепонемные тесты используют в качестве отборочных (скрининговых), так как они могут давать ложноположительные результаты. В трепонемных тестах используют антигены трепонемного происхождения. Их применяют для подтверждения результатов нетрепонемных тестов (ложноположительны?) при клиническом, эпидемиологическом и анамнестическом подозрении на сифилис, для диагностики скрытых и поздних форм, для ретроспективного диагноза. К трепонемным тестам относят: РСКт (РСК с трепонемным антигеном), РИБТ (или РИТ) – реакция иммобилизации бледных трепонем, РИФ (одна из лучших реакций), РПГА, ИФА, иммуноблотинг.

Специфическая профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана.

Неспецифическая профилактика предусматривает воздержание от случайных половых связей, раннее выявление больных, особенно со скрытой формой заболевания, и их своевременное и эффективное лечение.

Для лечения сифилиса используют антибиотики: пенициллин и его производные (водорастворимые и дюрантные формы), иногда эритромицин. Используют также препараты висмута, мышьяка, ртути.

Источник: https://med-tutorial.ru/m-lib/b/book/2239746527/360

Диагностика сифилиса – современные методы микробиологических и серологических исследований

Диагностика сифилиса микробиология

Среди венерических заболеваний сифилис занимает первые позиции по распространенности. Заболевание передается от больного к здоровому преимущественно половым путем. Диагностика сифилиса – сложный, поэтапный процесс, который не всегда приносит результат.

Подозрение на сифилис – к какому врачу идти?

Большое распространение заболевание получило потому, что многие молодые люди просто не знают, как определить сифилис, какие обследования необходимо пройти.

Лечением половых инфекций занимаются врачи венерологи или дерматовенерологи, так как в большинстве случаев подобные инфекции сопровождаются повреждением кожных покровов.

Медики советуют с профилактической целью обследоваться каждому пациенту репродуктивного возраста. Болезнь часто протекает в скрытой форме, поэтому выявить ее можно не всегда.

Методы диагностики сифилиса

Диагностические мероприятия по выявлению заболевания основываются на клинических и лабораторных данных. Диагноз «сифилис» ставится только после получения положительных результатов лабораторного исследования.

Ранняя диагностика сифилиса исключает прогрессирование заболевания. Первичный сифилис определяется исследованием отделяемого твердого шанкра эрозивных папул.

Среди основных методов лабораторной диагностики сифилиса необходимо выделить:

  1. Бактериоскопию.
  2. Серологическое исследование (специфическое и неспецифическое).
  3. Гистологию (при третичном сифилисе).
  4. Микроскопию (исследование нативного препарата, отделяемого эрозивных или язвенных высыпаний, пунктата из лимфоузла).

Микробиологическая диагностика сифилиса

Основу данного типа обследования составляет бактериоскопический метод диагностики сифилиса. Он предполагает обнаружение T.pallidum в материале, забранном из очагов воспаления:

  • твердый шанкр;
  • эрозивные нарушения;
  • лимфоузлы;
  • спинной мозг.

Предварительно врач протирает место забора материала тампоном с физраствором, затем раздражает поверхность эрозии специальной петлей, пока из нее не покажется тканевая жидкость.

При этом избегают смешивания материала с кровью. Жидкость помещается на предметное стекло. Препарат, полученный таким способом, исследуется с помощью микроскопа. Методы микробиологической диагностики сифилиса основываются на обнаружении возбудителя в материале. При отрицательном результате исследование проводят несколько дней подряд для полного исключения болезни.

Серологическая диагностика сифилиса

Для выявления и подтверждения диагноза «сифилис» в случае поздних и скрытых форм болезней основы диагностики составляет серологический метод. В большинстве случаев для диагностики сифилиса используют реакцию Вассермана.

Метод предполагает исследование венозной крови пациентов, которые обнаруживают антитела к антигенам возбудителя. Такой анализ на бледную трепонему помогает выявить заболевание даже при отсутствии явных клинических симптомов.

В зависимости от состава используемых для диагностики веществ, серологические методы подразделяют на:

  1. Специфические (трепонемные).
  2. Неспецифические (нетрепонемные).

Трепонемные тесты

Трепонемные тесты – это метод диагностики, использующий в качестве основы специфические антигены Treponemapallidum. Метод используется как для постановки, так и для подтверждения диагноза, для дифференциальной диагностики сифилиса.

Все специфические тесты имеют высокую чувствительность и точные результаты. Механизмы проведения специфических тестов неодинаковы, поэтому они имеют различные показания к применению.

К трепонемным тестам относят следующие методы лабораторной диагностики сифилиса:

  1. Реакцию связывания комплемента (реакция Вассермана, РВ) с трепонемным антигеном – РСКт.
  2. Реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ.
  3. Реакцию иммунофлюоресценции – РИФ. Применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс; РИФц – реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью или спинномозговой жидкостью.
  4. Реакцию пассивной гемагглютинации – РПГА.
  5. Иммуноферментный анализ – ИФА.
  6. Иммуноблотинг.

Нетрепонемные тесты на сифилис используются в качестве отборочных и не подходят для окончательной диагностики, выставления диагноза.

Они активно применяются для обследования больших групп населения с целью профилактических осмотров при возникновении неблагоприятной эпидемиологической ситуации. Тест обладает простотой проведения, имеет высокую чувствительность.

Результат диагностики оценивается врачом. Чувствительность неспецифических тестов при ранних формах заболевания составляет около 70 %, а при вторичном сифилисе – 100 %.

К нетрепонемным тестам диагностики сифилиса относятся:

  1. RPR (RapidPlasmaReagins).
  2. Тест с инактивированной сывороткой – МРП (микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном).

Данные флокуляционные тесты характеризуются простотой оценки. В ходе реакции образуется комплекс «антиген + антитело», который формирует хлопья, различимые с помощью увеличительного стекла.

Роль антигена в тесте выполняет кардиолипиновый антиген, который получают из сердечной мышцы быка.

Связь с антигенами возбудителя сифилиса при этом отсутствует, поэтому тесты и получили название нетрепонемные.

Экспресс-диагностика сифилиса

Современные методы диагностики сифилиса предполагают выявление заболевания на ранних стадиях. В качестве метода экспресс-диагностики используется RapidPlasmaReagin(RPR). Тест направлен на определение концентрации в крови антител к возбудителю сифилиса.

При заражении бледная трепонема в организме формирует защитные антитела IgG и IgM. Наличие их в образце забранной крови является косвенным доказательством присутствия в организме бледной трепонемы.

Данная диагностика сифилиса помогает установить точный срок продолжительности заболевания, время инфицирования.

Анализы на сифилис – расшифровка

Современная лабораторная диагностика сифилиса основывается следующих методах:

  • нетрепонемный тест – RPR или VDRL;
  • трепонемные тесты – РИФ и РПГА.

В странах СНГ для диагностики сифилиса чаще применяют реакцию Вассермана, также реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ. Оценку полученных результатов производит только врач, который учитывает клинические проявления заболевания, стадию патологии, состояние пациента. С примерными результатами исследований можно ознакомиться в таблице ниже.ото

Дифференциальная диагностика сифилиса

Когда у врача после первичного осмотра возникает подозрение на сифилис, он направляет пациента для сдачи крови на RV. Если результаты исследования подтвердили наличие бледной трепонемы в организме, проводится дифференциальная диагностика с определением стадии заболевания. При первичном сифилисе чаще бывают положительными РИФ и ИФА, однако это не позволяет выставить диагноз «сифилис».

Диагностика вторичного сифилиса не вызывает затруднений – резким положительным является результат по всем серологическим реакциям. РИБТ положительна больше чем у 50 % больных.

Третичная форма сифилиса практически не вызывает затруднений. Серологические реакции положительные в 50–90 % случаев.

Диагностика скрытого серопозитивного сифилиса основывается на серологических реакциях с подтверждением результата с помощью РИБТ.

Остроконечные кондиломы – кожные образования, появляющиеся преимущественно в области паха. Их наличие указывает на присутствие в организме ВПЧ. Своевременная и правильная терапия болезни позволяет избежать перерождения в злокачественную опухоль. ЗППП – что это такое, какие болезни считаются самыми опасными? Услышав термин ЗППП, что это такое за болезнь, как проявляется, пациенты знают не всегда. Данная аббревиатура используется для обозначения группы заболеваний, передающихся при половом контакте. В некоторых случаях инфицирование возможно и бытовым путем.
Герпес в интимной зоне – можно ли остановить вирус? Герпес в интимной зоне – одно из частых венерических заболеваний у женщин. Высыпания доставляют дискомфорт, нарушают привычный образ жизни. Своевременное обращение к врачу и правильное применение лекарств препятствует развитию осложнений. Уреаплазма у женщин – симптомы и лечение болезни эффективными препаратами Уреаплазма у женщин, симптомы и лечение обусловлены стадией болезни, долго не проявляется. Обнаружение патогена происходит при профилактическом гинекологическом осмотре. Чтобы вовремя заподозрить заболевание, необходимо знать его основные признаки.

Источник: https://womanadvice.ru/diagnostika-sifilisa-sovremennye-metody-mikrobiologicheskih-i-serologicheskih-issledovaniy

Микробиологическая диагностика сифилиса — Студопедия

Диагностика сифилиса микробиология

Возбудителем сифилиса – хронической инфекции со специфическим поражением кожи, внутренних органов и нервной системы, является бледная трепонема (Treponema palladium). Методы лабораторной диагностики этой инфекции зависят от ее стадии.

Материалом для микроскопического исследования при сифилисе являются отделяемое твердого шанкра, пунктат лимфатических узлов, отделяемое слизистых оболочек и кожи при вторичном сифилисе, а также сыворотка крови и спинномозговая жидкость для серологической диагностики. Методы микробиологической диагностики сифилиса представлены в схеме 17.

Микроскопический метод(темнопольная микроскопия с высокой разрешающей способностью) обычно применяется при первичном сифилисе при исследовании отделяемого твердого шанкра.

Бледная трепонема имеет 8-12 равномерных мелких завитков правильной формы, обладает характерным плавным штопорообразным вращательно-поступательным, маятникообразным, сгибательным и контрактильным движением.

На половых органах встречаются непатогенные Treponema refringens и Treponema balantidis, а в полости рта Treponema microdentium и Treponema buccalis, которые необходимо дифференцировать по морфологическим свойствам от бледной трепонемы.

В силу этих обстоятельств темнопольной микроскопия желательно подвергнуть пунктат регионарных лимфатических узлов. Применяется также дифференциация Treponema palladium от непатогенных трепонем методом люминесцентной микроскопии с моноклональными или поликлональными антителами, который является одновременно экспресс-методом диагностики сифилиса (рис. 24).

Схема 17.Методы микробиологической диагностики сифилиса

Рис. 24. Бледная спирохета (Treponema palladum). Прямая РИФ. х900

Методы окраски бледной спирохеты (по Романовскому-Гимзе, при котором она окрашивается в бледно-розовый цвет, импрегнацией серебром по Морозову), а также метод Бурри (изготовление негативных препаратов в капле туши) с последующим исследованием препаратов в обычном световом микроскопе имеют низкую воспроизводимость и существенно уступают темнопольной микроскопии по степени разрешающей способности, поэтому в реальной практике эти методы не применяются.

Бактериологический метод диагностики сифилиса не применяется в связи с трудностью культивирования бледных трепонем и отсутствием эффективных питательных сред.

Серологический метод. Рекомендуется использование следующих методов серодиагностики сифилиса, направленных на обнаружение в крови больных специфических антител к бледной трепонеме:

· Для проведения отборочных исследований на сифилис ставят неспецифический тест – микрореакцию преципитации (МР). В лунку полистироловой пластины вносят 3 капли исследуемой сыворотки и 1 каплю кардиолипинового антигена, смесь встряхивают и учитывают результаты.

Положительная реакция характеризуется выпадением хлопьев.

МР обладает высокой чувствительностью и специфичностью, хорошо сочетается с подтверждающими диагноз специфическими трепонемными тестами, позволяет объективно оценить эффективность лечения, однако необходимо ее подтверждение одним из специфических тестов (ИФА, РНГА, РИФ, РИБТ, РСК).

· ИФА применяется как для отборочных целей, так и для диагностики сифилиса. Разработаны тест-системы для определения антител к бледной спирохете классов G и M, что имеет важное значение для диагностики ранних форм сифилиса (в том числе врожденного), дифференциальной диагностики рецидивов, реинфекции, оценки эффективности лечения и т.д.

· РНГА также используется для целей отбора и диагностики. Обладает более высокой чувствительностью и специфичностью, чем другие серологические реакции при сифилисе, отличается простотой в постановке.

· РИФ сопоставима по своим результатам с ИФА и РНГА.

Сыворотку больного адсорбируют взвесью непатогенных трепонем или разводят 1:200, наносят на предметное стекло, содержащее фиксированные ацетоном бледные трепонемы из тестикул зараженного кролика, после чего на препарат наносят люминесцирующий иммуноглобулин кролика против глобулинов человека. Мазки исследуют с помощью люминесцентного микроскопа, отмечая при положительном результате наличие ярко-зеленого свечения трепонем.

· РИБТ. Сущность реакции заключается в способности антител к бледной трепонеме иммобилизировать (обездвиживать) их в присутствии комплемента. Подсчитывают процент иммобилизации, при этом при показателе 0-20% реакция считается отрицательной, от 21 до 50% – слабо положительной, от 51 до 100% – положительной.

· РСК ставится по общепринятой методике с неспецифическим кардиолипиновым (экстракт липидных фракций из бычьего сердца – реакция Вассермана) и специфическим (из разрушенных ультразвуком трепонем) антигенами. Положительная реакция характеризуется задержкой гемолиза.

· Иммуноблотинг – вариант ИФА для определения антител в крови больного к антигенам бледной спирохеты.

В настоящее время ставится вопрос о повсеместном введении более информативных, простых и экономичных ИФА и РНГА для диагностики сифилиса с одновременной отменой РСК и РИБТ.

Генодиагностика.Разработана ПЦР и метод ДНК-зондов для диагностики сифилиса.

Источник: https://studopedia.ru/10_139705_mikrobiologicheskaya-diagnostika-sifilisa.html

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.